液相色谱柱作为高效液相色谱(HPLC)系统的核心部件，其更换过程需严格遵循标准化流程以确保分离效果和仪器稳定性。以下是详细的更换步骤及注意事项：
一、前期准备工作
1. 仪器状态确认：关闭输液泵，停止流动相输送；关闭检测器光源；暂停数据采集程序。
2. 工具与材料准备：准备好专用扳手、清洁无绒布、医用酒精、一次性手套、新色谱柱以及废液收集容器。
3. 安全措施：佩戴丁腈手套以防溶剂刺激皮肤，并清理操作台面以防止工具滑落损伤色谱柱接口。
二、旧色谱柱拆卸步骤
1. 系统泄压：打开排空阀或调零阀，缓慢释放系统压力至接近常压，避免直接拆卸高压状态下的柱子导致溶剂喷溅和接头损坏。
2. 断开流动相管路：按顺序关闭泵→进样器→检测器电源(不同品牌可能有差异)，标记好管路连接方向以便后续正确复原。
3. 拆卸柱接头：使用配套的塞子堵住换下的柱子两端，防止污染物逸出。
4. 旧柱处理：对于污染严重的柱子，可用10%甲醇水溶液反冲再生。
三、新色谱柱安装规范
1. 外观检查：核实柱体标签信息是否完整，并通过观察窗查看填料状态是否良好。
2. 接头清洁与润滑：用蘸酒精的镜头纸擦拭新旧接头锥面，去除氧化层和颗粒残留，可适当涂抹少量凡士林或石墨润滑剂增强密封性。
3. 精准对接：将新柱入口端对准进样器出口，保持轴线水平手动旋紧螺母后再用扳手加固至指紧状态。特别注意箭头方向应与流动相流向一致。
4. 排出空气：开启泵低速冲洗甲醇的同时轻敲柱体排出气泡，待压力稳定且无毛刺峰出现后方可恢复正常流速。
四、系统调试与验证
1. 梯度试运行：运行标准测试程序，对比新旧柱分离度、塔板数、保留时间等参数评估性能提升情况。
2. 压力监测：正常柱压应低于厂商标称值，突然升高可能提示接头泄漏或筛板堵塞需及时排查。
3. 基线稳定性：走空白梯度30分钟，基线漂移应小于0.05mAU/小时，噪声过大则需检查检测池污染或光源老化问题。
